Một trong những điểm nổi bật trong âm nhạc của Palestrina là ông đưa các nốt bất thường nghịch tai vào những nhịp "yếu" . [15] Điều này tạo ra một loại phức âm mượt mà hơn và nhiều phụ âm hơn, hiện được coi là đặc trưng của âm nhạc cuối thời Phục hưng, giúp Palestrina trở thành nhà soạn nhạc hàng đầu của châu Âu (cùng với Orlando và Victoria ) sau sự đánh giá của Josquin des Prez (mất năm 1521) .

"Phong cách Palestrina" được dạy trong các khóa học đại học bao gồm Renaissance đối âm thường được dựa trên hệ thống hóa bởi nhà soạn nhạc thế kỷ 18 và nhà lý luận Johann Joseph Fux, xuất bản như Gradus ad Parnassum (Bước đến Parnassus, 1725). Lấy Palestrina làm mô hình của mình, Fux chia đối âm thành năm loài (do đó có thuật ngữ " đối âm loài "), được thiết kế như các bài tập cho sinh viên, triển khai các kết hợp nhịp điệu dần dần phức tạp hơn của các giọng trong khi tuân thủ các yêu cầu nghiêm ngặt về hài hòa và giai điệu. Phương pháp này đã được áp dụng rộng rãi và là cơ sở chính của đào tạo đối âm trong thế kỷ 19, nhưng Fux đã giới thiệu một số đơn giản hóa với phong cách Palestrina, đặc biệt là việc sử dụng bắt buộc của một firmus cantus trong semibreves, được điều chỉnh bởi các tác giả sau như Knud Jeppesen và RO Morris . Âm nhạc của Palestrina tuân theo nhiều cách với các quy tắc của Fux, đặc biệt là ở loài thứ năm nhưng không phù hợp với định dạng sư phạm của ông.

Sự hiểu biết chính, rằng phong cách đa âm "thuần túy" mà Palestrina đạt được tuân theo một tập hợp bất biến của các yêu cầu về kiểu dáng và tổ hợp, là chính đáng. Sách hướng dẫn của Fux đã được chứng thực bởi JS Bach cùng thời của ông, người đã tự mình hòa âm hai trong số các bản nhạc mixa của Palestrina để biểu diễn.

Theo Fux, Palestrina đã thiết lập và tuân theo các hướng dẫn cơ bản sau:

• Dòng chảy của âm nhạc là linh động, không cứng nhắc hay tĩnh.
• Giai điệu nên có một vài bước nhảy giữa các nốt. (Jeppesen: "Đường nét là điểm khởi đầu của phong cách Palestrina". ) [16]
• Nếu một bước nhảy xảy ra, nó phải nhỏ và phản ngay lập tức bằng chuyển động từng bước theo hướng ngược lại.
• Sự bất hòa được giới hạn ở những khoảng ngừng, những nốt chuyền và những nhịp yếu. Nếu một người rơi vào một nhịp đập mạnh (đang tạm dừng), nó phải được giải quyết ngay lập tức.

Fux bỏ qua việc đề cập đến cách thức mà giai điệu âm nhạc của Palestrina tuân theo cú pháp của các câu mà anh ta đã đặt cho âm nhạc, một điều không phải lúc nào cũng được các nhà soạn nhạc trước đó quan sát thấy. Cũng cần chú ý ở Palestrina là rất nhiều tông màu sơn . Ví dụ tiểu này đang giảm dần chuyển động âm nhạc với các từ tiếng Latin như descendit (xuống) hoặc một khoảnh khắc âm nhạc hoặc cadential tĩnh với dòng chữ de coelis (từ trời). [17]